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制备红细胞裂解物的方法。

时间:2019-09-23 09:13 来源:365bet亚洲平台 作者:365bet线上攻略
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现在您已准备好直接购买红细胞裂解液,您可以去北京索莱宝购买。
以下是红细胞裂解物配方:(供参考)1。
裂解液:事实上,它是一种温和的ACK裂解液配方:NH 4 CL 8。
29克KHCO 31。
00克Na2EDTA 37。
将2mg溶于1000ml蒸馏水,pH7。
2?7。
4,效果非常好。
注意:(1)将裂解液放入冰箱时,一定要预热至37°C。
管可以浸入熔体中,但如果夏天温度很高,则不需要这样做。(2)裂解后立即离心5分钟(混合所有试管后的时间)。(3)离心PBS两次。(4)溶液的pH值非常重要。最好的办法是同时减少混合。好久不好。我通常一次使用100毫升,并将其存放在黑暗中。
2。
离心速度:800至1000转,5分钟3。
轻轻地看是很重要的。
扩增淋巴细胞的最佳方法是RPMI 1640。因为它们是原代细胞,所以它们使用10%胎牛血清。
添加二巯基乙醇(β-2ME)5以成功进行细胞生长也非常重要。
细胞密度1-2×10 ^ 6 / mL